Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых.

ТЕМА: Способы ИССЛЕДОВАНИЯ МОРФОЛОГИИ Микробов. Микроскопичный Способ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Список КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ

1. Защитные приспособления у микробов. Споры, стадии и условия образования спор, био значение.

2. Капсулы микробов, их значение.

3. Жгутики, их строение. Ресницы. Секс-пили.

4. Сложные методы расцветки. Техника расцветки по Граму, Цилю-Нельсену, Бурри-Гинсу, Нейссеру.

5. Способы исследования микробов в живом состоянии Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых.. КОН-тест. Принцип способа.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ И ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Техника расцветки по Граму(указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом шаге окрашивания по способу Грама/ раскрасить таблицу)

Шаг расцветки Грамположительные бактерии Грамотрицательные бактерии
1. Окрашивание генцианвиолетом (генциановым фиолетовым) (время экспозиции 1минутка )
2. Обработка веществом Люголя (время экспозиции 1минутка ))
3. Обработка 96% спиртом (время экспозиции 1минутка Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. )
4. Окрашивание аква фуксином либо сафранином (время экспозиции 2 минутки ))

Главные морфологические группы микробов(изобразите в виде цветных рисунков в согласовании с расцветкой по Граму):

КОККИ
Диплококки Стрептококки Стафилококки Сарцины
ПАЛОЧКИ
Бактерии Бактерии Стрептобациллы Клостридии
ИЗВИТЫЕ ФОРМЫ
Вибрионы Спириллы Спирохеты

1►Расцветка по Граму мазков из бульонной культуры стафилококка, агаровой культуры пищеварительной палочки Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. и их консистенции. Зарисовка препаратов.

Смесь микробов (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) Расцветка по Граму Повышение x 630

2►Изготовление мазка из культуры дифтерийной палочки, расцветка метиленовым голубым по Леффлеру и по Нейссеру. Зарисовка препаратов.

Corynebacterium diphtheriae Расцветка по Леффлеру Повышение x 630 Corynebacterium diphtheriae Расцветка по Нейссеру Повышение x 630

3►Постановка Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. и учет результатов КОН-теста с культурами золотистого стафилококка и пищеварительной палочки.

Итог КОН-теста (с 3% веществом) Staphylococcus aureus стена не разрушается, Escherichia coli стена разрушается образуются тянущиеся за петлей слизистые нити .

ДЕМОНСТРАЦИИ

C.diphtheriae Bordetella Escherichia coli B. anthracis
расцветка метиленовым голубым по Леффлеру расцветка по Граму расцветка по Граму Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. расцветка по Граму
Палочки неверной формы, хаотично, «римские V и X» Коккобактерии – немного вытянутые палочки Палочки с округленными концами Стрептобациллы, образующие в организме капсулу

(указать способы расцветки микроскопичных препаратов и особенности морфологии микробов – форму и размещение в препарате)

4►Изготовление мазка из агаровой культуры спороносных бацилл, расцветка по Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. Цилю-Нельсену (либо по способу Ожешко), микроскопия и зарисовка.

Техника расцветки по Цилю-Нельсену(указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом шаге окрашивания/ раскрасить таблицу)

Шаг расцветки Расцветка спор по Ожешко На нефиксированный мазок наносят 0,5% р-р HСl и подогревают 1-2 минутки над рламенем, промывают водой, фиксируют и дальше Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. см. ниже Расцветка кислото-устойчивых микробов
1. Обработка на мазок наносят фильтровальную бумагу наливают карболовый фуксин Циля и нагревают над пламенем спиртовки до отхождения паров (время экспозиции до отхождения паров ) Также нужно снять бумажку, остудить продукт, ополоснуть водой
2 !. Обработка 5% веществом H2SO4 Концентрация 5%
3. Окрашивание аква веществом метиленового голубого (время экспозиции) 3-5 минут

* МТ – Mycobacterium Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. tuberculosis; Str – стрептококк.

5►Микроскопия препаратов микробов, окрашенных по Цилю-Нельсену. Зарисовка препаратов.

Bacillus anthracoides Расцветка по Цилю-Нельсену. Повышение x 630 Mycobacterium tuberculosis в мокроте Расцветка по Цилю-Нельсену. Повышение x 630

6►Изготовление мазка из агаровой культуры палочки риносклеромы, расцветка по Бурри-Гинсу, микроскопия и зарисовка.

Klebsiella rhinoscleromatis Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. Расцветка по по Бурри-Гинсу Повышение x 630

7►Изготовление продукта «раздавленная капля» либо «висячая капля» из сенного настоя для исследования подвижности (указать особенности микроскопии продукта)

1 шаг 2 шаг 3 шаг

1) Нанесение взвеси микробов на покровное стекло;

2) Смазывание краев лунки на предметном стекле вазелином и помещение покровного стекла на предметное стекло; 3)Готовый продукт Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых., микроскопируют с иммерсионным обьективом


Бакте́рии (др.-греч. βακτήριον — палочка) — группа (королевство) прокариотных (безъядерных) микробов, в большинстве случаев одноклеточных. К истинному времени описано около 10 тыщ видов микробов и подразумевается, что их существует выше миллиона, но само применение понятия вида к микробам связано с рядом проблем.

Спириллыотличаются спиральным (штопор) строением клеточки и биполярным расположением Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. жгутиков; энергию они получают за счет дыхания. Выделяют несколько родов спирилл. S. volutans - огромная спирилла, которую всегда можно отыскать в свиной навозной жиже; она получила известность благодаря открытию «волютина» (полифосфатов); в незапятанной культуре вырастает только при пониженной концентрации 02 (приблизительно 5%), ее следует потому считать микроаэротолерантнои. Spirillum minus –возбудитель Содоку – заболевания укуса Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. крыс.

Способ Нейссера употребляется для выявления зернышек волютина. Мазок окрашивается уксуснокислым метиленовым голубым 2-3 минутки, при всем этом происходит хим взаимодействие красителя и волютина. Зерна волютина окрашиваются в темный цвет. При промывке водой тело клеточки обесцвечивается и потом в течение 1 мин докрашивается везувином в желто-коричневый цвет Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых..

Способ Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых микробов (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых.

  1. Мазок окрашивают карболовым фуксином Циля (основной краситель) при нагревании 3-5 мин.
  2. Обесцвечивают веществом серной кислоты (дифференцирующее вещество) в течение 1-2 мин.
  3. Промывают водой.
  4. Докрашивают 3-5 мин метиленовым голубым (дополнительный краситель).

Клеточная стена кислотоустойчивых микробов отличается высочайшим содержанием липидов Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых.. Они с трудом окрашиваются, но потом задерживают основной краситель при обесцвечивании кислотой. Некислотоустойчивые бактерии просто окрашиваются, а потом просто обесцвечиваются кислотой и окрашиваются дополнительным красителем.

Способ Ожешко сходен с способом Циля-Нильсена, но отличается внедрением раствора соляной кислоты в качестве протравы, разрыхляющей оболочку споры, которая плохо принимает красители. После протравы соляной кислотой Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. при нагревании в течение 2-3 мин мазок фиксируется и окрашивается по способу Циля-Нильсена. При всем этом цитоплазма клеточки окрашивается в голубий цвет, а споры в красноватый.

Способ Бурри-Гинса употребляется для расцветки капсульных микробов и основан на том, что капсула не принимает красители. Капсулу выявляют нехорошим контрастированием фона Метод Циля-Нильсена предназначен для дифференциации кислотоустойчивых бактерий (возбудителей туберкулеза и лепры) от некислотоустойчивых. по Бури. Для этого черную тушь соединяют в культурой и высушивают. После чего проводят фиксацию в пламени горелки, окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - аква фуксином в течение 1 минутки и промывают водой 5-10 секунд. В итоге на черном фоне отлично видна тусклая капсула и красноватые тела бактерий.


metallograficheskij-mikroskop.html
metallokeramicheskij-mostovidnij-protez.html
metalloproizvodnie-gipana-i-vozmozhnosti-ih-primeneniya-v-burenii-referat.html